اختبار ELISA هو فحص طبي معملي ، يحدث خلاله ما يسمى تفاعل الجسم المضاد للمستضد. يمكن اختبار المستضدات المختلفة التي تلعب دورًا في الطب البشري أو الطب البيطري. يتم تفويض المعاهد المختبرية المعتمدة فقط لإجراء الاختبار في ألمانيا.
ما هو الإجراء؟
ضمن الفحوصات الطبية المخبرية ، ينتمي اختبار ELISA إلى ما يسمى الإجراءات المناعية. من خلال إجراء الاختبار ، البروتين الجزيئات يمكن اكتشافها بشكل مختلف تمامًا سوائل الجسم. ELISA هو اختصار لفحص المواد الماصة المناعية المرتبطة بالإنزيم. لذلك ، فهو تصنيف باللغة الإنجليزية أصبح راسخًا في الاستخدام الطبي الألماني. ينتمي اختبار ELISA إلى ما يسمى بالإجراءات المناعية ضمن الفحوصات الطبية المخبرية. يمكن استخدام إجراء الاختبار للكشف عن البروتين الجزيئات في مجموعة متنوعة من سوائل الجسم. الكشف عن هؤلاء الجزيئات يسمح بدوره باستخلاص استنتاجات حول بعض الأمراض أو الصور السريرية ، وهذا هو السبب في أن الأطباء يجعلون تشخيصهم يعتمد أيضًا على نتيجة اختبار ELISA. لذلك فإن إجراء الاختبار له أهمية كبيرة في الممارسة السريرية اليومية ، سواء في العيادات الخارجية أو المرضى الداخليين. المناظرة سوائل الجسم، على سبيل المثال كله دم أو السوائل من المفاصليتم إرسالها إلى المختبر فور استلامها من المريض. عادة ما تكون هذه عينات عاجلة تمامًا ، لأن المادة الأصلية تعتبر حساسة ويجب فحصها في أسرع وقت ممكن. يمكن ما يسمى بالعينات المكدسة قيادة إلى نتائج سلبية خاطئة لأن المرضية البروتينات التي سيتم اكتشافها تم تقليلها أو تدهورها تمامًا في هذه الأثناء. وبالتالي ، فإن ما يسمى بالتحليلات المسبقة تلعب دورًا مهمًا في ELISA ؛ يجب تكرار النتائج المشبوهة أو السلبية مرة أخرى في حالة ظهور الأعراض السريرية المناسبة.
الوظيفة والتأثير والأهداف
من أجل أداء الاختبار الصحيح في مختبر طبي معتمد ، فإن أنابيب الاختبار وما يسمى بألواح الميكروتيتر ضرورية للغاية. هذه الألواح ذات المسافات البادئة شبه المقعرة الدقيقة مصنوعة من بلاستيك خاص وكل منها مغطى بجسم مضاد محدد للغاية. إذا كان المستضد المراد اكتشافه موجودًا في سائل الجسم المراد فحصه ، عندئذٍ يحدث تفاعل محدد لجسم مضاد للمستضد وفقًا لما يسمى مبدأ القفل والمفتاح. يمكن إدخال مادة العينة في اللوحات إما يدويًا بواسطة أفراد المختبر باستخدام الماصات أو تلقائيًا بالكامل. في المعاهد الطبية المختبرية الحديثة ، يتم استخدام أنظمة مؤتمتة بالكامل فقط لتشخيص ELISA. ومع ذلك ، يجب مراقبتها من قبل موظفين مدربين ومساعدي المختبرات الطبية والتقنية. ما يسمى بمراقبة الجودة الداخلية والخارجية هي أيضًا مسؤولية طاقم المختبر ، متفوقًا على الطاقم الطبي للطب المخبري ، الأمراض المعدية علم الأوبئة وعلم الأحياء الدقيقة. بعد دفعة الاختبار الأولى ، أي بعد أن يتم تمرير المادة على الألواح ، تكون المستضدات المحددة في العينة ، إن وجدت ، قد ارتبطت بالفعل بـ الأجسام المضادة على اللوح البلاستيكي. ثم يتم إجراء غسل بمحلول ملحي فسيولوجي لإزالة العوامل المتداخلة مثل المستضدات غير المرغوب فيها أو البروتينات من التحضير. هذه الخطوة مهمة للغاية لتجنب ردود الفعل الإيجابية الكاذبة. يمكن أن يكون للنتيجة الإيجابية الخاطئة التي يفسرها المختبر عواقب وخيمة على المريض. في الخطوة الثانية من الاختبار ، يضاف جسم مضاد آخر مقترن بإنزيم. يرتبط هذا الجسم المضاد المسمى أيضًا بالمستضد. في الخطوة الثالثة والأخيرة ، تتم إضافة صبغة خاصة بكمية محددة ، والتي تتحلل إلى حد أكبر أو أقل بواسطة بقايا الإنزيم التي لا تزال موجودة. فقط هذا الإنزيم يمكن أن يتحلل ، والذي لم يكن مرتبطًا مسبقًا بمولد الضد مع الجسم المضاد. الإنزيم الحر قادر على شق الصبغة المضافة. يمكن تحديد الكمية الدقيقة للصبغة المشقوقة بدقة باستخدام طريقة معملية أخرى ، تسمى القياس الضوئي. يتيح ذلك استخلاص استنتاجات دقيقة حول ما إذا كان المستضد موجودًا في عينة مادة على الإطلاق ، وإذا كان الأمر كذلك ، فكم هو اختبار ELISA لا يستخدم فقط للتشخيص الأولي أو لتأكيد التشخيصات المشتبه بها لأمراض معينة والصور السريرية ولكن أيضًا لمراقبة تقدمهم. إذا كان المستضد من التركيز في الاختبار يصبح أقل خلال مسار علاجيعتبر العلاج ناجحًا.
المخاطر والآثار الجانبية والمخاطر
يكتسب اختبار ELISA قيمته الإعلامية في المقام الأول من خلال الكشف عن الهياكل المستضدية في سوائل الجسم. يسمح الاختبار بما يسمى ببيان نوعي ، ولكن أيضًا شبه كمي وكمي حول الاشتباه في وجود مستضدات معينة في سوائل الجسم. جميع دم لا يمكن استخدامها للاختبار ، فقط مصل الدم. اختبار مباشر على المريض ، على سبيل المثال من شعري دم ل الإصبعلذلك ، كما هو الحال مع بعض الاختبارات المصلية الأخرى ، غير ممكن حتى الآن. في الطب البشري ، يستخدم اختبار ELISA بشكل أساسي للكشف عن المستضدات في العدوى البكتيرية أو الفيروسية أو الفطرية. بالإضافة إلى ذلك ، كل النتائج الإيجابية التهاب الكبد يتم فحص الأمصال مرة أخرى باستخدام اختبار ELISA كمعيار. تأكيد هرمونات، على سبيل المثال فترة الحمل يمكن أيضًا تحديد هرمون HCG من خلال اختبار ELISA. في حالة حدوث مضاعفات معينة أثناء فترة الحمل، معرفة دقيقة ب من التركيز من هرمون الحمل في الدم مفيد جدا من الناحية التشخيصية والعلاجية. مؤشر آخر للاختبار هو اكتشاف ما يسمى بالبروتينات في البول ، كما يحدث ، على سبيل المثال ، في مختلف أمراض الأورام، مثل المايلوما المتعددة. لا يزال اختبار ELISA يتم إجراؤه في العديد من المختبرات اليوم ، ولكنه يعتبر قديمًا من قبل الخبراء. يقترن رد الفعل المناعي الانزيمات في اختبار ELISA ، تم استبداله بشكل متزايد في السنوات الأخيرة بملصقات إشعاعية الأجسام المضادة، والتي توفر نتيجة قياس كمي أفضل. وتسمى هذه الاختبارات أيضًا اختبار RIA ، اختبار الامتصاص المناعي الراديوي. إن التطورات المحددة الأخرى لـ ELISA هي طرق كيميائية خفيفة مثل التلألؤ أو التألق.
