غير مرتبطة-جينة التحليل هو طريقة اختبار جينية مستهدفة.
في إطار هذا الإجراء ، في حالة الاشتباه في وجود مرض وراثي ، والذي ينجم عن تغيير واحد في أ جينة، يتم فحص الجين المشتبه في كونه سببيًا. وغالبًا ما يتم ذلك أيضًا بشكل روتيني كجزء من فحوصات الفحص.
المؤشرات (مجالات التطبيق)
- تشخيص الأمراض أحادية الجين مثل التليف الكيسي.
الإجراء
المواد اللازمة
- دم الهيبارين (1-2 مل على الأقل)
تحضير المريض
- ليس من الضروري
عوامل التخريب
- لا شيء معروف
طريقة المختبر
في أغلب الأحيان ، تستخدم طريقة التسلسل فيجينة التحليل هو طريقة سانجر ، وتسمى أيضًا تخليق إنهاء السلسلة ، حيث يتعلق أولاً بعزل الحمض النووي من دم. ثم كل الهدرجة الروابط التي تعمل على تثبيت الحمض النووي ثنائي الشريطة معًا مكسورة. بعد التسخين عند 94-96 درجة مئوية لمدة دقيقة واحدة ، يوجد شريحتان مفردتان. بعد ذلك ، يحدث التهجين التمهيدي المزعوم ، حيث يتم إرفاق مادة أولية. يحدث هذا عند حوالي 60 درجة مئوية. التمهيدي هو قليل النوكليوتيد (أوليغومرات تتكون من عدد قليل من النيوكليوتيدات) التي تعمل كنقطة انطلاق لتكرار الحمض النووي الانزيمات مثل بوليميريز الحمض النووي. بعد التهجين التمهيدي ، يحدث التمدد ، حيث ترتفع درجة الحرارة إلى 72 درجة مئوية. هذا يسمح للبرايمر بالالتصاق ببوليميراز الحمض النووي (الانزيمات الذي يصنع الحمض النووي). بعد 30 دورة في المتوسط ، يمكن إيقاف الإجراء.
يتم إجراء مزيد من التحليل بواسطة شعري الكهربائي في أجهزة التسلسل الآلي. والنتيجة تسمى مخطط كهربية. يظهر هذا ألوانًا مختلفة تشير إلى التسلسل الأساسي.
من خلال هذه الطريقة ، يمكن اكتشاف الطفرات التي تنطوي على قاعدة نووية واحدة فقط داخل الجين ، والمعروفة أيضًا باسم الطفرات النقطية.
